Reprodukční imunologie
Protilátky proti spermiím v séru (ASA-screen)
U infertilních párů je prevalence přítomnosti protilátek reagujících se spermiemi výrazně vyšší. Protilátky proti spermiím negativně zasahují do pohybu spermií v ženském rozmnožovacím ústrojí.
Indikace
- narušení krevně-testikulární bariera způsobena poraněním
- protilátky jsou detekovány u většiny mužů po vasektomii
- chronické infekce urogenitálu
- u žen se vyskytují zvýšené hladiny protilátek proti spermiím v případě chronické infekce genitálního traktu
Protilátky proti Zona pellucida v séru (ZP-screen)
Pouze spermie, která prodělala akrozomovou reakci (serie biochemických a strukturálních změn), může penetrovat do zona pellucida (nebuněčný obal vajíčka) a následně fúzovat s plazmatickou membránou vajíčka. Blastocysta (oplodněné vajíčko) přibližně 4 dny po oplodnění vstupuje do dělohy a během několika dalších dní dojde k jejímu uhnízdění. Jde o shluk přibližně sto buněk uzavřených v zona pellucida, která vajíčku v uhnízdění zabraňuje. Vajíčko se nejprve musí z tohoto obalu uvolnit a pak teprve se může uhnízdit ve zbytnělé děložní sliznici.
Indikace
Protilátky proti tomuto obalu mohou být příčinou neplodnosti žen.
Protilátky proti ovariím v séru (OVA-screen)
Protilátky proti ovariím (vaječníkům) mohou být příčinou neplodnosti žen.
Vyšetření nespecifické a specifické aktivity NK buněk (průtoková cytometrie)
- vyšetření aktivity přirozených buněk-zabiječů( NK buněk) proti těhotenské tkáni - trofoblastu.
U žen s anamnezou opakovaných potratů nebo opakovaně neúspěšných IVF se předpokládá zvýšená aktivita těchto buněk se zvýšenou produkcí řady působků, především tumor nekrotizujícího faktoru těmito buňkami. Tento faktor inhibuje následně uhnízdění vajíčka a časnou formaci placenty.
Vyšetření ejakulátu
Protilátky proti spermiím v ejakulátu ve třídě IgG a IgA (SPG / SPA)
V ejakulátu se mohou nacházet protilátky proti spermiím, a to ve třídě IgG a IgA. Autoprotilátky ve třídě IgG jsou výsledkem transsudace protilátek z krve a jejich přítomnost koreluje s hladinou protilátek proti spermiím k krvi.
Indikace
Protilátky proti spermiím negativně ovlivňují pohyblivost spermií.
Vitalita (VIT), apoptóza (časná – APC, pozdní – APP, nekróza - N), motilita (MOT) a počet (POC) spermií v ejakulátu (muž)
V tomto testu se zjišťuje časná a pozdní apoptóza, dále nekróza spermií (počet mrtvých a živých spermií) a pohyblivost a počet spermií.
Indikace
Všechny tyto parametry významně ovlivňují oplodnění vajíčka.
Vitalita spermií - průtoková cytometrie pomocí propidium jodid
Apoptóza - průtoková cytometrie pomocí anexinu 5
Motilita spermií - průtoková cytometrie pomocí rhodaminu 123
Počet spermií – průtokovou cytometrií pomocí flurescenčně značených partikulí
Přítomnost leukocytů (CD45) v ejakulátu (Leu)
Zvýšená přítomnost leukocytů v ejakulátu infertilních mužů je příčinou zvýšeného obsahu vysoce reaktivních kyslíkových radikálů.
Indikace
Přítomnost leukocytů a následně volných kyslíkových radikálů negativně ovlivňuje
oplodnění.
Metoda: průtoková cytometrie
Kvalita akrozómu spermií (nativní – Hs-8, po permeabilizaci – Hs-8)
Na vrcholu hlavičky spermie se nachází tzv. akrozóm, tj. sekreční váček produkující enzymy potřebné k průniku do vajíčka.
Indikace
Kvalita akrozómu významně ovlivňuje penetraci spermie zonou pellucidou a následnou fúzi s plasmatickou membránou vajíčka.
Metoda: průtoková cytometrie pomocí monoklonální protilátky Hs-14
[zpět]